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納米抗體定制服務(wù)

Nanobodies(又稱VHH抗體或單域抗體)是來源于駝科動(dòng)物,主要是羊駝和駱駝的小型抗體片段。它們是這些動(dòng)物中自然存在的一種抗體,比人體中常見的四肽鏈抗體要小得多。

這種單域抗體由來自駝科重鏈抗體的單個(gè)單體可變區(qū)域(VHH)組成。這種獨(dú)特的結(jié)構(gòu)使得Nanobodies在各種應(yīng)用中具有高度的多功能性和優(yōu)勢(shì):

小分子量

納米抗體的小尺寸(約15 kDa)使其具有強(qiáng)大的組織透過性,可以直接穿透血腦屏障,有利于腫瘤的診斷和靶向治療。

高穩(wěn)定性

納米抗體的高穩(wěn)定性來自其內(nèi)部的多個(gè)二硫鍵,可以承受高溫、強(qiáng)酸和強(qiáng)堿等變性條件,在90℃處理后仍能再生并恢復(fù)生物活性。

低免疫原性

納米抗體不含F(xiàn)c片段,避免了由Fc片段引起的免疫反應(yīng),并且與人類VH基因的同源性高達(dá)67%~87%,因此在人類生物樣本中具有良好的生物相容性。

大規(guī)模生產(chǎn)交貨期短

納米抗體是親水性且單肽鏈,無需糖基化修飾,因此可以在原核表達(dá)系統(tǒng)中制備。同時(shí),納米抗體不易失去生物活性,因此易于儲(chǔ)存。

CUSABIO擁有羊駝免疫文庫(kù)(VHH文庫(kù))和羊駝天然文庫(kù),因此我們可以為客戶提供從抗原生產(chǎn)到合格重組抗體的一站式解決方案。

服務(wù)流程:

羊駝免疫庫(kù)構(gòu)建&篩選(80工作日)
服務(wù)流程
I
抗原制備
II
羊駝免疫(30工作日)
III

噬菌體表面展示文庫(kù)構(gòu)建(20工作日)

保證交付:

  • 不少于5μg總RNA;
  • 噬菌體文庫(kù)測(cè)試報(bào)告。
IV

噬菌體表面展示篩選、陽(yáng)性單克隆納米抗體鑒定(15-20工作日)

保證交付:

  • 篩選過程噬菌體滴度;
  • ELISA檢測(cè)原始數(shù)據(jù);
  • 陽(yáng)性克隆測(cè)序及序列分析文件;
  • 至少top 10 陽(yáng)性單克隆的DNA序列與氨基酸序列。
V

重組抗體表達(dá)與純化(10-20工作日)

保證交付:

  • 抗體表達(dá)質(zhì)粒;
  • 放大200ml純化多少提供多少,每個(gè)抗體至少100μg;
  • 純度95%以上(SDS-PAGE檢測(cè))。
VI

重組抗體質(zhì)控(3-5工作日)

保證交付:

抗原ELISA和內(nèi)源性樣本的FACS

羊駝天然庫(kù)篩選(30工作日)
服務(wù)流程
I
抗原制備
II

天然羊駝噬菌體庫(kù)篩選(15-20工作日)

保證交付:

  • 篩選過程噬菌體滴度;
  • ELISA檢測(cè)原始數(shù)據(jù);
  • 陽(yáng)性克隆測(cè)序及序列分析文件;
  • 不少于10條陽(yáng)性單克隆的DNA序列與氨基酸序列。
III

重組抗體表達(dá)與純化(10-20工作日)

保證交付:

  • 抗體表達(dá)質(zhì)粒;
  • 放大200ml純化多少提供多少,每個(gè)抗體至少100μg;
  • 純度95%以上(SDS-PAGE檢測(cè))。
IV

重組抗體質(zhì)控(3-5工作日)

保證交付:

抗原ELISA和內(nèi)源性樣本的FACS

注意:

① 客戶可提供抗原或選擇華美生物抗原制備服務(wù);

② 抗原要求:1mg、純度 > 90%(SDS-PAGE檢測(cè))、濃度 >0.5 mg/mL。


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